聽完師兄師姐的“長篇大論”，魏濼和柳沅沉默了許久。直到順際寧打了個“酣暢淋漓”的嗬欠，魏濼才緩緩開口。 　　“那這‘突變體庫’或者‘誘變’……”魏濼想了半天，也不清楚該如何表達，隻好草草地收場，“具體是怎樣的呀？” 　　師姐大概也沒明白魏濼想要問些什麼，隻能依照自己的理解，笑著回答道：“找別人要現成的突變體，或者我們自己‘誘發’斑馬魚突變咯。然後進行最直接的‘表型’觀察，看看這些魚有沒有長得‘與眾不同’嘛！” 　　其實說起大型的“庫藏”資源受益者，最令錢餘羨慕的，當屬陳幸和郭子昱。他倆都研究癌癥，而那些醫療數據庫收集的“資源”，大都包括癌癥患者的基因組數據——癌癥患者通常會出現某些腫瘤相關基因的突變，當這些基因呈現表達異常的時候，人類體內便可能出現腫瘤組織，繼而形成癌癥。這些患者對於其他“無瘤”的健康人來說，便算得上是“突變體”了。 　　現有的各大“資源庫”，除卻美國癌癥基因組圖譜數據庫TCGA，還有源自歐洲的癌癥基因芯片數據庫，國際癌癥基因組數據庫ICGC……再結合NCBI開發的高通量基因表達數據庫GEO，以及基於上述數據庫開發的各類網站、軟件等等——譬如癌癥基因組數據探索，UCSC Xena基因組瀏覽器，miRCancer癌癥小RNA數據庫，TIMER腫瘤免疫浸潤數據庫，-Meier生存曲線繪圖儀，GEPIA數據庫可視化網站……真可謂“數不勝數”。這些“工具”能夠給使用者提供幫助，方便他們將各大數據庫的數據，進行分類、匯總，大大節省了分析時間。因此，光是某一癌癥的單一基因數據，就足夠讓癌癥科研人員“眼花繚亂”。 　　若是課題組有條件，也可以選擇“自行建庫”——例如，將體外培養的癌細胞進行藥物等特殊處理，交予生物公司做基因測序分析，再與對照組做對比，尋找感興趣的“癌癥相關因子”。 　　不過哪怕不去“建庫”，腫瘤研究者從以上的數據庫中，將同類型的數據自行做幾個交集，也能多多少少篩選到“一星半點兒”的“候選”基因，有那麼一些眉目。 　　其次能讓錢餘羨慕的，便是他的室友“植物學帥小夥”了。 　　帥小夥整日在溫室的花叢中“拈花惹草”，實驗操作愈發熟練。晚上回到宿舍，他也常跟錢餘嘮嗑，聊一聊擬南芥以及自己所做的工作。 　　千禧年伊始，人們就完成了野生型擬南芥Columbia-0的全基因組測序，於是SALK研究所著手對其基因組的各個基因，進行了T-DNA插入和鑒定，構建了一個較為完整的“突變體庫”，並將突變體種子進行共享，讓研究者們能夠通過“擬南芥信息資源網站”TAIR（The Arabidopsis Resource）進行購買。 　　研究人員根據染色體號、基因名等，在網站上尋找自己需要突變體，然後加入購物車、下單，突變體種子就能從大洋彼岸運過來，經過海關檢疫，最後來到自己的實驗室。 　　“想要買哪個基因的突變體啊，隻要課題組舍得付錢就行。”帥小夥給錢餘做過科普，“其實在歐洲也有一個‘突變體庫’，叫做‘uNASC’——歐洲擬南芥儲存中心（Eurasian Arabidopsis Stock Center）。 　　隻不過我們實驗室在那兒買得比較少，多數都在TAIR購買。” 　　“事實上擬南芥研究了這麼多年，那些常見的基因，基本都被研究‘透’了，像我做‘植物免疫’的也是如此。雖然還有一些功能未知的基因，但我們也不能憑空去‘瞎猜’它們的作用。如果貿然把這些突變體的種子通通都買回來，那不是浪費錢嘛——萬一這些基因沒有功能呢？” 　　“所以靠譜的方法呀，是我們自己拿野生型的擬南芥種子，進行‘EMS化學誘變’，然後篩選突變體，再進行基因鑒定。” 　　EMS，全稱為“甲基磺酸乙酯”，是一種常用的化學誘變劑，能夠誘發DNA分子產生較多的堿基突變。所以EMS屬於致癌物，使用者必須做好安全防護。不過帥小夥總有些“大大咧咧”，拿他的話來說，也不外乎是“就把種子用EMS泡一泡”，如此簡單。 　　“但是後麵這篩選、鑒定的工序也挺繁瑣的，還好擬南芥有‘生長周期短’這一優勢，若是讓我做其它的農作物啊，估計我要打‘退堂鼓’咯……”帥小夥感嘆道。 　　就連我國的“天宮二號”環遊太空，人們也在艙內給擬南芥留了“一席之地”，讓它和水稻共享“太空之旅”——可見擬南芥在植物科學研究中的地位。 　　那麼斑馬魚的“突變體庫”又是怎樣的情況呢？ 　　錢餘覺得在這方麵，自己算是“不走運”的。 　　雖然早有美國、歐洲、澳大利亞等國的研究機構，設立了斑馬魚突變體資源庫，但若想從這些機構手中獲得特定的斑馬魚突變體，並不是一件容易的事情，需要使用者解決專利、運輸等等問題。 　　對於我國大多研究者而言，這魚的“長途奔襲”，自然不比“乾巴巴”的擬南芥種子運輸，需要多費一番心思。更何況，他們還需麵臨“知識產權”等難題。 　　師姐介紹道：“如今我們在‘國家斑馬魚資源中心CZRC’（China Zebrafish Resource Center）也能買到不少斑馬魚品係的胚胎或者成魚，還有一些‘轉基因魚’的魚苗……但這些都還遠遠不夠。” 　　“於是從2013年開始，我國就聯合了國內的24家科研機構，著手開展‘斑馬魚1號染色體全基因敲除’計劃，稱為‘ZAKOC聯盟’（Zebrafish All Genes KO for Chromosome 1）。可斑馬魚一共有25條染色體，這項工作也隻是一個‘開端’而已。”順際寧也開了口，“不過這一‘裡程碑式’的項目啊，給了廣大科研人員相當大的啟發——這是利用‘CRISPR/Cas9’技術開展的‘基因精準敲除’，相當有前景。” 　　“CRISPR/Cas9”係統，又稱為“基因剪刀技術”，它源自原核生物的一種天然免疫係統。 　　其中，“CRISPR”即“規律成簇的間隔短回文重復”序列（Clustered Interspaced Short Palindromic Repeats），它是原核生物基因組內部的一段序列。 　　病毒入侵原核生物時，會將自己的“一段基因”整合到原核生物體內，讓後者為自己提供“養分”，使得病毒自身的基因得以復製。而這“一段基因”，正好與“CRISPR”序列相匹配。 　　為了抵禦病毒的入侵，原核生物也進化出一種特殊的“係統”——它將病毒的這“一段基因”儲存至自身，將其作為“對感染的記憶”。當它再次遭遇病毒時，便能夠對入侵者加以“識別”，將病毒的這“一段基因”進行“切割”，使其失去作用。 　　而“Cas”是指“CRISPR相關”（CRISPR-associated），這些“Cas基因”編碼的“Cas蛋白”，就具有“切割”病毒基因的功能。“Cas9蛋白”便是其中的一個基因產物。 　　那麼，原核生物的CRISPR是如何引導Cas9上前，繼而進行切割作業的呢？ 　　答案是“RNA分子的相互作用”——CRISPR序列轉錄為RNA分子，找書苑www.zhaoshuyｕan.ｃｏm 再結合特殊的RNA形成復合物，該復合物便能引導Cas9與“靶標”配對，然後對其進行切割。 　　至此，“CRISPR/Cas9”技術徹底改變了“遊戲規則”——人們將“CRISPR/Cas9”載體進行了合理改造，研究人員隻需設計一段特殊的“單鏈導向RNA（sgRNA）”，就能利用Cas9蛋白，對目的基因進行“精準切割”。 　　提及此，順際寧很興奮：“現在呀，不管是細胞，還是各類動物、植物，幾乎都能用‘CRISPR/Cas9’進行基因‘定點’編輯，算得上是‘指哪打哪’了。‘切斷’了特定的基因，也就相當於突變體了。” 　　自“CRISPR/Cas9”係統的功能機製於2012年被完整詮釋，到如今也不過短短4年時間，此技術已風靡全球。恐怕不久之後，諸如陳幸、帥小夥……大家都會利用這一技術，開展日常的基因分子實驗。 　　“我有預感，這項技術遲早是要拿‘諾貝爾獎’的！”順際寧對其十分看好，“我已經和尹老師商量過了，我們也可以自行使用‘CRISPR/Cas9’體係，試著給斑馬魚做基因編輯。” 　　“我最近一直在設計實驗方案，等你們謝運師姐寫完畢業論文，再讓她幫忙‘審核’一下，我們就打算正式‘開乾’了！” 　　兩位新生聽得“雲裡霧裡”，他倆都沒有關注過順際寧口中的這項技術，感覺無從談起。於是魏濼問道：“那有沒有針對斑馬魚的‘誘變’技術呢？”