日子一天天地過去，眾人“按部就班”，各自與日俱進。這其中，當屬郭子昱收獲最大——他的蛋白實驗終於獲得進展，足以應付審稿人提出的要求了。 　　那日郭子昱回了宿舍，向師兄師姐們探索經驗後，便將實驗過程進行“逐條拆解、逐步排查”，最終找出了失敗的“罪魁禍首”——原來是實驗室的電泳儀出了些故障，時而電壓不穩，轉膜時的電壓值“一上一下”，跳躥得厲害。正巧天氣炎熱，最近實驗室冰袋也不足，郭子昱又是個十足的“懶人”，不想耗費體力去樓下的“冰室”打冰，補充“冷源”，於是導致轉膜時溫度過高，影響了轉膜效果，大部分蛋白都沒能從電泳膠“轉移”至印跡紙上。再加上抗體的效價原本就不高，等到了“顯影”這最後一步，結果肯定是“雪上加霜”——想要的目的蛋白條帶，是“白茫茫的一片”。 　　如此條件下，自然無法得到理想的結果了。 　　所幸郭子昱及時糾正了“錯誤”，獲得了一張“完整的”蛋白圖。隻可惜那上麵的條帶歪歪扭扭，像極了“舞動之獅”，於是他又請教了陳幸。在陳幸的幫助下，他最終令結果精進了不少……待一切實驗補充完畢，郭子昱終於能“大手一揮”，將文章投回了期刊編輯的郵箱裡。 　　編輯也頗有效率，隻過了三天，郭子昱的文章就被期刊接收，直接在線發表了。郭子昱總算能放下心裡的一塊“大石頭”，可以每天“一心一意”地出現在門診和病房，為患者們勞心勞力了。 　　陳幸也打心眼裡為他感到高興，隻是忍不住叮囑他：“等你讀博找導師的時候啊，得一定問清楚這畢業的‘條件’了。” 　　郭子昱的文章影響因子不算高，隻是勉勉強強過了畢業的“及格線”，可他若是要讀博，就憑他現今文章的質量和水平，在陳幸看來，可遠遠達不到“標準”。 　　“幸兒，你就別‘打擊’我了。”郭子昱剛感覺自己“滿血復活”，又恢復到平時那副“不羈”的“吊兒郎當”樣兒，一臉輕鬆地回答道，“你明知道我不擅長做科研，所以我隻能‘走一步，看一步’咯……” 　　陳幸近日算不上繁忙，因此也有時間過來看看郭子昱，然後兩人順便出去“搓了一頓”，也算是慶祝郭子昱文章發表、“畢業有望”。 　　陳幸帶的兩個師弟師妹，最近參加了動物實驗培訓，結果卻是“一喜一悲”——師弟倒是上手很快，隻是師妹嘛……恐怕得用“一言難盡”來形容了。 　　許是女孩子天生就懷有一顆“憐憫之心”，她看著眼前這“弱小的生靈”，遲遲都下不了手。 　　“昨天培訓的是小鼠的‘頸椎脫臼’和解剖，我和她兩人一組。”師弟看到陳幸回了實驗室，於是便說起了培訓課上的情形，一臉無奈，“本來想著她沒做過此類操作，於是便讓她先上手試一試，可誰知她一直都‘狠不下心’，最後我就隻能選擇自己動手，而她全程都在一邊‘旁觀’著……” 　　“都已經麻醉了呀。”師弟提醒道，“你動作麻利一點，它不會感覺到疼的。” 　　可師妹隻是輕輕地拽著鼠尾，然後一人一鼠，大眼瞪小眼…… 　　罷了罷了，師弟看不下去了，隻能“取而代之”——他快速地提了提鼠尾，然後乾凈利落地一按頭、一拉尾，三下五除二，兩人分到的這隻小鼠，瞬間就去“見了上帝”。 　　“好了。”師弟仍是“麵不改色”，對她提議道，“接下來的解剖操作，您老先自己試一試？” 　　這“活小鼠”如今成了“死物”，她應該就能動手了吧…… 　　可師妹仍舊一臉驚恐，手裡拿著器具上前，卻半天都沒有動作。她似乎還在思考著，是不是需要在心裡多默念幾句“阿彌陀佛”，才可以抬手“下第一刀”。 　　“唉，就你這表情，我看呀，不是這小鼠上了‘斷頭臺’，而是你要上這‘斷頭臺’了。”師弟嘆了一口氣，又問她，“你本科沒有做過任何動物實驗嗎？” 　　師妹搖了搖頭：“我又不是動物學專業的，而且‘生理實驗課’的老師也是‘睜一隻眼閉一隻眼’，我解剖的那堂課壓根就沒動過手。” 　　“唉，算了算了，那你今天就先看我操作好了。”於是他有條不紊地開始了解剖，一邊認真操作，還一邊給她講解小鼠的各個身體器官部位。 　　若不是師妹“心不在焉”，恐怕就會發現，師弟的操作幾乎和老師的示範“一模一樣”，都是近乎“教科書式”的標準操作。隻可惜剛剛在課上，師妹看著老師一臉淡定地“處理”小鼠，早就有些“心理不適”，根本無暇去關注這些細節…… 　　師弟對著陳幸搖了搖頭，始終覺得自己的這位“同屆同門”太過“菩薩心腸”、感情用事：“她的分子和細胞實驗，都做得近乎‘完美’，唯獨這小鼠實驗……唉，她是完全下不去手啊！” 　　聽完了師弟的講述，陳幸也不免有些擔心——師妹現在依舊過不了心裡的“那道坎兒”，也不知她最終能不能通過培訓考核。要是過不了，導師會作何安排呢？或許……她這今後的動物實驗，恐怕都需要師弟“代勞”了。 　　在大學城的另一端，錢餘正在實驗室裡忙活。他近日也和前段時間的郭子昱一般，天天都在“跑蛋白”。 　　“師兄，我看你都‘跑’了三、四天的蛋白啦！”魏濼感慨道，“每天都重復同一種實驗操作，你不會覺得太單調了麼？” 　　錢餘無奈地笑了笑，回答道：“沒辦法呀，這突變體鑒定，除了要在‘分子層麵’進行確定之外，還得保證該蛋白‘沒有表達’不是？” 　　突變體，指遺傳物質發生變化的生物個體，其DNA可能發生堿基替換、插入、缺失等，導致某個基因無法正常表達。學院的各實驗室雖然研究不同物種，但其突變體的鑒定過程，其實都大致相同。 　　首先需要進行分子鑒定，即提取該突變體基因組DNA，經PCR擴增後，將克隆產物送至生物公司進行測序，可明確該樣品是否為突變體，並確認其突變位點信息。 　　由於基因的表達，通常包括DNA向mRNA的“轉錄”，以及mRNA“翻譯”為蛋白質的過程。因此，該突變體DNA的改變，會在多大程度上影響後續的“轉錄”和“翻譯”效果，需要進一步驗證。 　　最後，還需輔助突變體的各類表型觀察。其中最顯而易見的，便是對比該突變體與正常的野生型個體，查看兩者是否存在肉眼可見的“外貌”差異。 　　“提取斑馬魚基因組DNA，可以用成魚的尾鰭。”錢餘給魏濼做起了介紹，“將成魚進行麻醉以後，再將尾鰭切下，不過該成魚後續啊，需要進行單尾隔離飼養。” 　　“而斑馬魚突變體的突變基因表達水平，還需分別用整體原位雜交技術檢測mRNA表達，Western blot檢測蛋白豐度。” 　　“那你這……”魏濼看了看錢餘擺在桌上的樣品，繼續說道，“應該也做了不少突變體的蛋白鑒定了吧？” 　　“還有一些是‘轉基因魚’的蛋白樣品，我乾脆也一塊兒做鑒定了。” 　　這時順際寧走進了實驗室，看到僅錢餘一個人，就“霸占”了好幾個電泳槽——這工作量可真是夠嗆。 　　他不禁感慨道：“要是上學期期末的時候，實驗室沒有買這臺‘化學發光成像儀’啊，尹老師現在看到你這一排排的樣品，估計會感覺‘無比肉疼’。” 　　“為啥呀？”魏濼感到很疑惑，“不就是多跑了幾個樣品嘛！” 　　錢餘笑著回答：“師兄說的不是這些電泳槽，而是指‘顯影’的方式。” 　　“這‘化學發光成像儀’啊，自帶了‘CCD拍照成像係統’，可連接電腦，運用配套軟件進行Western顯影操作，如今深受科研人員的喜愛。”順際寧解釋道，“不過這傳統的顯影方式呢，用的則是‘X-光膠片’。” 　　“化學發光”的原理其實也很簡單，目前Western最常用的“化學發光底物”是辣根過氧化物酶HRP。通用的商業抗體“二抗”通常以HRP標記，當完成抗體孵育、進行顯影之前，需要在“印跡紙”上加入“化學發光液”——其中A液為“魯米諾”，又稱“發光氨”；B液為“過氧化氫”。此二者混合後，再與結合了HRP標記抗體的“印跡紙”一起孵育，產生化學反應而生成的反射光，可以在425nm條件下，通過“X-光膠片”或者“化學發光成像儀”采集圖像。 　　魏濼想了一會兒，開口道：“我記得課本裡有介紹過，好像需要什麼‘X-光片夾’，然後‘曝光’什麼的。但具體的操作嘛……” 　　“那你有沒有‘沖洗’過照片呀？”順際寧又問魏濼，“就是最傳統的、用‘黑白膠卷’沖洗的那種照片。” 　　魏濼搖了搖頭：“沒有，我隻在電影和電視劇裡看到過。大概是……要進到一間不透光的屋子，貌似叫什麼‘攝影暗房’之類的。” 　　順際寧抬起右手，朝門外指了指：“看到轉角的那間‘暗室’了嗎？” 　　魏濼轉過頭一看，又接著點了點頭，問道：“那不是‘雜物房’麼？剛開學的時候，我幫實驗室管理員搬舊書，還進去過一次。那裡麵‘烏漆嘛黑’的，墻壁都塗黑了，而且還鋪了一層厚厚的報紙——簡直就是一間‘小黑屋’嘛！” 　　“那就是我們實驗室之前，用來進行顯影的‘暗房’啊。”順際寧進一步介紹道，“將Western的‘印跡紙’加入‘化學發光液’之後，便將其收入到‘X-光片夾’中，帶入暗房內。在黑暗環境下，將‘X-光膠片’置於‘印跡紙’上進行‘曝光’，時間自定。到點之後呀，就將該‘X-光膠片’迅速沒入‘顯影液’中顯影，待有條帶出現後，再浸入‘定影液’中，最後放入清水中洗去殘留液體，就大功告成啦！” 　　錢餘補充道：“其實跟‘沖洗照片’是一樣的，就是簡單的‘曝光’、‘顯影’、‘定影’、‘水洗’這幾步。不過呢，不需要像‘洗膠卷’那樣，將其進行‘放大’處理。” 　　錢餘剛進實驗室那會兒，大夥用的都是‘X-光膠片’，所以每次顯影，他都必須把自己“關進暗房裡”。 　　“其實兩種‘顯影方式’都是可行的，隻不過傳統的‘X-光膠片’顯影，找書苑 www.zhaosｈuyuａｎ.com 需要自行控製曝光時間。不像現在的這臺‘化學發光成像儀’，在‘化學發光液’作用的有效時限內，通過調整‘顯影係統’的曝光時間梯度，可得出數張不同時間的曝光蛋白圖，供科研人員隨意選擇並儲存，若是曝光時間不理想，還能再次進行調整。隻要‘化學發光作用’尚未‘淬滅’，可以隨時調整曝光時間，直到令你滿意為止。” 　　順際寧繼續說道：“可是這傳統的顯影方法，那就沒這麼‘自動化’了。每次顯影，我們都是要隨身帶著‘計時器’的。特別是剛開始的時候，手生得很，一張片子大概需要曝光多久，都需要我們慢慢地摸索經驗——蛋白的上樣量、轉膜效果、抗體的效價等，都決定了曝光的時間長短。信號強的話，所需的曝光時間就短，若是稍微多了幾秒鐘，那顯影後得到的蛋白圖啊，就是‘黑糊糊’的一片，別提有多難看了。” 　　“我們實驗室用的一直都是佳能的‘X-光膠片’，那東西可不便宜啊。每次實驗通常先‘壓片’曝光一張，若是效果不佳，那就隻能‘再接再厲’了。你看你師兄今天‘跑’了這麼多個電泳槽子，要是有那麼幾張需要重新‘曝光’的話，那這一盒‘X-光膠片’啊，可就要用去了‘小一半’咯。” 　　錢餘聽了順際寧的調侃，也無奈地自嘲道：“確實是啊，要是我再‘手殘’一點，尹老師估計會是‘滴血的心在地上打滾’的狀態。” 　　三人都默默地笑了。 　　“你和柳沅算是趕上‘好時候’了，現在‘顯影’啊，再也不用被關進‘小黑屋’裡咯……”